原核表达条件:原核表达实验步骤[朗读]

启动子16srrna结合位点即sd序列外源基因终止子若要得到有意义产物,外源基因不能含内含子。

真核细胞和原核细胞的dna有编码区和非编码区组成.但是真核细胞的dna中的编码区中又有内含子和外显子.外显子是可以转录翻译的.内含子是控制转录翻译的.而原核细胞却没有内含子和外显子.它的编码区是连续的.所以它只能表达连续的编码区,不能表达真核细胞那不连续的编码区.所以真核细胞的dna要在原核中表达,就只要外显子就够了.就要把内含子去掉。

影响外源基因高效表达的各种因素:一、外源基因的表达效率①启动子的强弱.有效的转录起始是外源基因能否在宿主细胞中高效表达的关键步骤之一,也可以说,转录起始的速率是基因表达的主要限速步骤。

菌浓度od=0.6-1.0开始诱导,你可以在2h,4h,8h的时候取个样,跑一个page胶考马斯染色看看总的目的蛋白浓度,每个蛋白表达速度不同,需要的时间不一样,一般4h就。

你好!原核表达体系的优点:培养方法简单.迅速.经济.适合大规模生产工艺原核表达体系的缺点是:(1)缺乏合适的转录后加工机制,因此不宜表达真核生物基因组基因;(2)缺乏合适的翻译后加工机制,因此表达产物不能适当折叠和修饰;(3)很难在大肠杆菌表达体系中表达大量的可溶性蛋白.真核表达体系的有点:(1)既能表达cdna,也能表达真核基因组dna;(2)表达产物适当修饰并区域化分布.缺点是:操作技术难.费时.不经济.打字不易,采纳哦。