单克隆抗体制备流程:单克隆抗体技术流程[朗读]

(1)细胞培养技术和细胞融合技术是单克隆抗体技术的基础.(2)图中培养基属于选择培养基,用来筛选杂交瘤细胞.(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,其最大的优越。

过程1)免疫脾细胞的制备制备单克隆抗体的动物多采用纯系balb/c小鼠.免疫的方法取决于所用抗原的性质.免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。

将纯化过的抗原注射进小鼠等试验动物血液,产生免疫后提取其浆细胞和骨髓瘤细胞融合,培养、稀释、再分开培养直到制得单细胞群后提取分泌产物能和抗原结合的,保留培养物大量繁殖,培养液中即可提取大量单克隆抗体.特点:灵敏度高,专一性强,主要用于诊断、检定,也可用于治疗。

1.对小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠产生免疫反应;2.得到相应的b淋巴细胞;3.将小鼠骨髓瘤细胞与b淋巴细胞融合,再用特定的选择培养基进行筛选;4.在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长(这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体);5.对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞;6.最后,将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖,这样,从细胞培养液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体了。

(1)动物细胞培养(微生物培养)(2)选择(3)特异性强,灵敏度高(4)灭活的病毒(5)在体外大量增殖分泌特异性抗体(6)骨髓造血干(7)主动运输(主动吸收)。