细胞冻存条件:细胞的冻存过程[朗读]

细胞冻存1.取待冻存的细胞用胰酶消化(见相关实验细胞传代培养部分),用培养基将细胞冲洗下来.800r/min离心5min,弃上清收集细胞.如果是悬浮生长的细胞,则可直接离心收集细胞.2.加入适量冻存液(10%甘油+90%培养基,或者10%dmso+90%培养基)制成细胞悬液.细胞浓度宜大,3*106个/ml左右,并可适量增加牛血清浓度至20%.3.细胞悬液装入冻存管中.用胶布封裹,做好标记(写上细胞种类、时间及冻存条件等).4.冻存管在4℃下存放30min,转放-20℃1.5~2h,再转人-70℃4-12h后即可转移到液氮内(-196℃),注意进行登记。